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与彻底不发展管最低药物浓度为最低抑 菌浓度

来源:本站原创   更新时间:2019-09-07

  中药的抑菌感化的阐发论文:谈对中药的抑菌感化的阐发 【摘要】由实菌惹起的病害防治坚苦,只需有部门实菌 细胞不被,正在适宜前提下就能发展繁衍,因而本抗菌实 验以实菌发展完全遭到来评价抑菌结果,即正在较长时间 (14 d)仍能连结对实菌发展的,才是抱负的抗菌药物。 目标:筛选抗龙胆叶枯病菌活性的中药。方式:以龙胆叶枯 病菌(alternaria sp.)为供试菌种,对 9 种中药乙醇提取 物进行抗龙胆叶枯病菌活性尝试,采用无限稀释法,测定最 低抑菌浓度。成果:9 种中药乙醇提取物均有抑菌感化,其 中蛇床子、川楝子提取物 14 d 的最低抑菌浓度 mic100 小于 0.1 g/ml。结论蛇床子、川楝子具有较强的抗龙胆叶枯病菌 感化,可进一步开辟为防治龙胆叶枯病药物。 【从题词】中药 杀菌剂 抑菌 感化 阐发 龙胆叶枯病(alternaria sp.)是龙胆出产中的主要叶 部病害,发生遍及。正在龙胆及其它药材出产中对病害的防治 大量利用化学药剂,导致污染、农药残留,影响药材的 质量。我国中药资本丰硕,很多中药含抑菌活性物质,从中 寻找动物病原菌活性物质,研制动物源新型杀菌剂,防 治药用动物病害, 对出产合适 gap 尺度中药材具有主要意义。 目前,国表里学者正在中草药抗实菌尝试方面已做了大量 的工做 ,而从中筛选抗药用动物病原实菌的研究较少。本 研究按照以往中药抗线 种中药,研究其 对龙胆叶枯病菌(alternaria sp.)的感化。 一 材料取方式 1. 材料:1)中药:地肤子、苦参 、知母、川楝子、 蛇床子、大风子、苍耳子、白鲜皮、土槿皮购于市同 泰大药房,经判定为正品;95%乙醇(天津泰达化工无限公 司) , 葡萄糖 (沈阳市试剂三厂) , 琼脂 (青岛水产物加工场) 。 2) 供试菌种:龙胆叶枯病菌,从北安栽培的粗 糙龙胆 gentiana scabra bunge 平分离纯化获得,采用从病 组织分手培育, 将分手获得的菌种接种到 pda 培育基上培育, 待发生孢子后,采用单孢分手的方式对菌种进行纯化。使用 柯赫氏证病(kochˊs postulate)证明为龙胆叶枯病 病菌,通过对分生孢子梗、分生孢子等的察看判定为 alternaria sp.。 3)培育基:用 pda 培育基。 2 方式 1)样品的制备:将中药样品于 60℃烘干,经破坏过 20 目筛,加 5 倍量的 95%乙醇回流提取两次,2 h/次,滤过, 滤液减压浓缩至 1 g/ml(即每毫升含 1 g 生药) 。浓缩液于 冰箱(0~4℃)冷藏备用。 2) 菌种活化:将保留的菌种接于 pda 培育基上培育 4d 备用。 3) 抑菌尝试:正在无菌操做前提下,以 1 g/ml 生药的 药液为原液,用灭菌 pda 培育基稀释,别离 稀释为原液的 50% ,40% ,30% ,20%,10% ,5%,1% ,0.8%,0.6%,0.4%, 0.2%,0.1%(相当于每毫升含 0.5,0.4,0.3,0.2,0.1, 0.05,0.01,0.008,0.006,0.004,0.002,0.001 g 生药) 12 个浓度的药基,对照为 70%乙醇取代药液配制,并节制药 基中的乙醇含量正在 15%以下(正在配制高浓度的药基前,对加 入的药液挥去部门乙醇) , 每管接种新培育的线℃培育。每天察看接种菌 削发展环境,凡发展的菌落记为“+”,凡完全不发展的菌 落记为“-”。 4) mic100 简直定:mic100 为杀实菌剂(fungicide)的 最低抑菌浓度,菌种接种正在每种药物系列梯度浓度培育基 上,恒温箱中培育 7 d 和 14 d,用察看,接种菌块未 扩大,无细胞发展,取完全不发展管最低药物浓度为最低抑 菌浓度(mic)。 二 成果 抗菌尝试成果: 9 种中药乙醇提取物对龙胆叶枯病菌 (alternaria sp.)的感化(略)各中药乙醇提取物的 最低抑菌浓度,成果 中药乙醇提取物对龙胆叶枯病菌(略) 研究表白,9 种中药乙醇提取物对龙胆叶枯病病菌 (alternaria sp.)均有分歧程度的感化,跟着培育时 间的耽误,抑菌感化逐步削弱,培育 7 d 最低抑菌浓度 mic100≤0.2 g/ml 有地肤子、蛇床子、白鲜皮、川楝子、大 风子,最低抑菌浓度 mic100≤0.1 g/ml 有蛇床子、白鲜皮、 川楝子;培育 14 d 最低抑菌浓度≤0.2 g/ml 有川楝子、蛇 床子、大风子,培育 14 d 最低抑菌浓度 mic100 为 0.1 g/ml 有川楝子、蛇床子。将药基上的菌种转接到无药 pda 培育基 上仍不克不及发展,表白实菌已被,川楝子、蛇床子乙醇提 取物有较强抗龙胆叶枯病菌(alternaria sp.)感化,其次 为白鲜皮和大风子,可进一步做田间尝试。 三 会商 用乙醇提取抗菌活性物质优于水提法。本尝试采用乙醇 回流提取法,有益于生物碱等生物活性物质的提取,同时减 少了提取液中卵白质、多糖等杂质。 本尝试采用正在药基上接种菌丝体的方式测定药物抗实 菌活性,属于固体琼脂筛选抗实菌药物,并采用无限稀释法 测定 mic100,该法操做简洁。前人尝试多采用培育基取药物 同时灭菌的方式,本尝试正在药基配制时,仅对培育基进行高 温灭菌,冷却至 70℃摆布用微量移液器插手药物,药物无效 成分不被, 正在经长时间培育未繁殖杂菌, 尝试方式靠得住。 由实菌惹起的病害防治坚苦,只需有部门实菌细胞不被 ,正在适宜前提下就能发展繁衍,因而本抗菌尝试以实菌 发展完全遭到来评价抑菌结果,即正在较长时间(14 d)仍 能连结对实菌发展的,才是抱负的抗菌药物。9 种中药 经长时间抑菌试验察看,川楝子、蛇床子乙醇提取物对龙胆 叶枯病菌抑菌感化强而持久,是抱负的抗龙胆叶枯病实菌的 中药。白鲜皮正在培育 7 d 时抑菌感化最强,虽然到 14

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